5×蛋白上樣緩沖液(配β-巰基乙醇)
簡(jiǎn)要描述:貨 號(hào):P0270名 稱:5×蛋白上樣緩沖液(配有β-巰基乙醇)規(guī) 格:10ml價(jià) 格:120
產(chǎn)品型號(hào):
所屬分類:緩沖液
更新時(shí)間:2024-01-07
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
5×蛋白上樣緩沖液(配β-巰基乙醇)
產(chǎn)品組成
產(chǎn)品組成 | 規(guī)格 | 保存溫度 |
5×蛋白上樣緩沖液 | 10ml | 2-8℃ |
β-巰基乙醇 | 1ml | 常溫 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本產(chǎn)品適用于SDS-PAGE(SDS變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時(shí)作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為SDS,β-巰基乙醇,溴酚藍(lán),緩沖鹽溶液等。
SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷*被SDS掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異,SDS還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu),β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。zui終無(wú)電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑,可大概指示電泳結(jié)束的時(shí)間。
保存時(shí)間:
未混合前2-8℃可保存一年,混合后保存三個(gè)月。
使用說(shuō)明:
1. 根據(jù)用量,以每1ml的5×蛋白上樣緩沖液加入50ulβ-巰基乙醇,混勻。此即為配好的蛋白上樣緩沖液。此配好的蛋白上樣緩沖液在2-8℃保存三個(gè)月。
2. 請(qǐng)按每40微升蛋白樣品加入10ul配好的上樣緩沖液的比例來(lái)使用。如果蛋白濃度過(guò)高,可用雙蒸水稀釋。
3. 混勻后,100℃水浴加熱3-5分鐘,使蛋白變性。
4. 冷卻到室溫后,離心數(shù)秒后,混均再離心30秒取上清直接上樣即可。
注意事項(xiàng):
β-巰基乙醇味道特別難受,所有操作是在通風(fēng)柜中操作。如果沒(méi)有通風(fēng)柜,也盡量找一通風(fēng)處操作,或者使用5×蛋白上樣緩沖液(含DTT)。
8%膠時(shí)溴酚藍(lán)大概在30kd左右, 12%膠時(shí),約在20kd左右,15%膠時(shí),大概在10kd。請(qǐng)根據(jù)自己目標(biāo)條帶來(lái)判斷結(jié)果電泳時(shí)間。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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