DNA產(chǎn)物純化試劑盒
簡要描述:貨 號:D0011名 稱:DNA產(chǎn)物純化試劑盒規(guī) 格:100T/400T價 格:120.00/360.00
產(chǎn)品型號:
所屬分類:其他自產(chǎn)即用試劑
更新時間:2024-01-07
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
DNA產(chǎn)物純化試劑盒
DNA純化試劑盒
試劑盒組成 | 100T | 400T | 保存溫度 |
結(jié)合液 | 25ml | 100ml | RT |
玻璃奶 | 5ml | 20ml | RT |
TE緩沖液 | 10ml | 30ml | RT |
原理簡介
本試劑盒利用*的緩沖液,可從PCR產(chǎn)物,連接產(chǎn)物,酶切產(chǎn)物等溶液中回收較大DNA片段,同時除去其它蛋白、無機鹽及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。
對于50ul的含DNA樣品,本試劑盒(以100T為例)可用100次。對于更小體積的樣品,本試劑盒使用次數(shù)更多。如果一次純化1ml樣品,本試劑盒(以100T為例)可用5次。
DNA產(chǎn)物純化試劑盒注意事項
1、回收<200bp DNA片段時,應(yīng)加大結(jié)合液的體積(如8倍體積或者更高)。
2、玻璃奶的多少決定吸附能力的大小,對于核酸含量低的樣品,可適當減少加入量,同時減少加入洗脫液的量(TE緩沖液)。
3、如非指明,所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
操作步驟
1.將含有DAN的樣品離心,取上清轉(zhuǎn)移到一新的離心管中(如無沉淀,可省去此步)。
2.向溶液中加入5倍體積結(jié)合液(如為小片段,可加入8倍體積或者更高體積)混勻。正常情況應(yīng)該為淡黃色,如溶液變紅,請加入不超過1/10體積的3M 乙酸鈉 PH5.2。
3.玻璃奶混勻。取50ul混勻的玻璃奶加入上面溶解的溶膠液中,混勻(如DNA含量過低,可減少玻璃奶加入量,如只加入20ul)。
4.室溫放置2-3分鐘。期間可翻轉(zhuǎn)混勻1-2次。
5.10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振蕩混勻,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清,70%乙醇重復(fù)洗一次,再用無水乙醇洗一次。去上清,再次離心2分鐘,用小吸頭吸去上清(70%乙醇洗兩次,無水乙醇洗一次)。
6.室溫放置10分鐘,加入50ul左右TE緩沖液混勻溶解,50-55℃水浴5分鐘。離心,取上清轉(zhuǎn)移到一新的離心管中。此為所提質(zhì)粒。
7.電泳或者其他方法檢測,進入下游實驗。
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