PCR試劑盒(教學用)
簡要描述:貨 號:D0049名 稱:PCR試劑盒(教學用)規(guī) 格:50T/500T價 格:240.00/920.00
產(chǎn)品型號:
所屬分類:其他自產(chǎn)即用試劑
更新時間:2024-01-07
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
PCR試劑盒(教學用)
常規(guī)PCR發(fā)展到如今已經(jīng)是非常成熟,對于大多數(shù)的科研人員來說,買TAQ酶和dNTP就可以,而如果為省事,可以直接買PCR MasterMix。而本試劑盒從PCR的原理來讓學生學會PCR。本試劑盒帶有模板和引物,可以產(chǎn)生500bp的單一條帶。
試劑盒組成:
試劑盒組成 | 50次 | 500次 | 儲存條件 |
Taq Polymerase(5U/ul) | 50ul | 500ul | -20℃ |
10×PCR Buffer | 1ml | 5ml | -20℃ |
MgCl2(25mM) | 1ml | 5ml | -20℃ |
模板(1ng/ul) | 100ul | 1ml | -20℃ |
上游引物(10mM) | 100ul | 1ml | -20℃ |
下游引物(10mM) | 100ul | 1ml | -20℃ |
ddH2O(PCR用) | 2ml | 25ml | -20℃ |
6×DNA Lodding Buffer | 1ml | 1ml | -20℃ |
500bp對照(50ng/ul) | 100ul | 1ml | -20℃ |
說明書 | 1份 | 1份 | RT |
保存說明:10×PCR Buffer、MgCl2(25mM)、ddH2O(PCR用)在2-8℃保存一個月對實驗無影響,500bp對照、模板和引物在2-8℃保存一周對實驗無影響。微量試劑打蓋前請離心。
自備試劑:瓊脂糖,電泳緩沖液,核酸染料(如EB,goldveiw等)
操作步驟:
按照下面的量加入試劑:可一次配50ul,或者一次配更多的量,如500ul,混勻再分成50ul一管。一般Taq Polymerasezui后加入。
加入試劑 | 加入量總50ul | 加入量500ul |
ddH2O(PCR用) | 37ul | 370ul |
10×PCR Buffer | 5ul | 50ul |
MgCl2(25mM) | 4ul | 40ul |
模板(1ng/ul) | 2ul | 20ul |
上游引物(10mM) | 2ul | 20ul |
下游引物(10mM) | 2ul | 20ul |
Taq Polymerase(5U/ul) | 1ul | 10ul |
總體積 | 50ul | 500ul |
混勻。
按照下面的條件設(shè)置反應(yīng)
溫度 | 時間 | 循環(huán)次數(shù) |
94℃預(yù)變性 | 3min | 1 cycles |
94℃變性 | 30sec | 30 cycles |
54℃退火 | 30sec | |
72℃延伸 | 500-2000bp/1min | |
72℃終延伸 | 5min | 1 cycles |
反應(yīng)完降溫到25℃ |
反應(yīng)完后,取5ul產(chǎn)物,加入1ul 6×DNA Lodding Buffer 混勻電泳檢測??赏瑫r在兩測跑一個500bp的對照。(1.5%的膠可以得到理想的結(jié)果)
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