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BCA蛋白濃度測定試劑盒 BL521A

BCA蛋白濃度測定試劑盒 BL521A

簡要描述:BCA蛋白濃度測定試劑盒 BL521A
產(chǎn)品編號:BL521A
產(chǎn)品規(guī)格:500T
產(chǎn)品品牌:Biosharp
產(chǎn)品價格:420.00

產(chǎn)品型號:

所屬分類:Biosharp*生物科技

更新時間:2024-01-08

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

詳情介紹

BCA蛋白濃度測定試劑盒 BL521A 現(xiàn)貨

BCA 蛋白濃度測定試劑盒 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 BL521A BCA 蛋白濃度測定試劑盒 500 次 簡介: BCA 蛋白濃度測定試劑盒的原理是蛋白質(zhì)分子中肽鍵結(jié)構(gòu)在堿性環(huán)境下能與 Cu2+生產(chǎn) 絡(luò)合物,并將 Cu2+還原成 Cu+,而 BCA 試劑可以特異性地與 Cu+結(jié)合,形成穩(wěn)定的有顏色的 復(fù)合物,并在 562nm 處有zui大的光吸收值,該復(fù)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比,可以 根據(jù)吸收值的大小來測定蛋白的含量。 試劑盒組份: 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 BL521A-1 BCA 試劑 A 100 ml BL521A-2 BCA 試劑 B 3 ml BL521A-3 牛血清白蛋白(BSA)標(biāo)準(zhǔn)溶液(5 mg/ml) 2×1 ml BL521A-4 PBS 溶液 10 ml 使用說明: BCA 工作液配制: BCA 工作液配制: 將試劑 A 和試劑 B 按照體積比 50:1 比例混合,配成 BCA 工作液。 如,取 50ml 試劑 A 與 1ml 試劑 B 混合,配成 51 ml BCA 工作液。兩者混合時會有 沉淀形成,*混勻后沉淀消失,溶液應(yīng)為澄清淡藍(lán)色溶液。。 注:BCA 工作液室溫可放置一周不失效。 微孔板測定程序:(工作范圍 20-2000 μg/ml) 1、蛋白標(biāo)準(zhǔn)品配制:室溫*溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,取 20µl 5mg/ml BSA 蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液用 PBS 溶液稀釋至 100µl,使其終濃度為 1.0 mg/ml。 2、按照下表配制 BSA 標(biāo)準(zhǔn)測定溶液: 編號 0 1 2 3 4 5 6 7 8 1 mg/ml BSA 標(biāo)準(zhǔn)溶液 μl 5 mg/ml BSA 標(biāo)準(zhǔn)溶液 μl BSA 標(biāo)準(zhǔn)溶液 µl 0 0.5 2.5 5.0 10 15 20 6 8 PBS 溶液 μl 20 19.5 17.5 15 10 5 0 14 12 BSA 終濃度 μg/ml 0 25 125 250 500 750 1000 1500 2000 總體積 µl 20 µl 3、將適當(dāng)體積的待測樣品加入到微孔板中,并用 PBS 補(bǔ)足到 20 µl

4、向微孔板中加入 200 μl BCA 工作液,混勻,37℃放置 30 分鐘; 注:也可以室溫放置 2 小時,或 60℃放置 30 分鐘。BCA 法測定蛋白濃度時,顏色會隨 著時間的延長不斷加深。并且顯色反應(yīng)會因溫度升高而加快。如果濃度較低,適合在較高溫 度孵育,或適當(dāng)延長孵育時間。 5、測定 562 nm 處的吸光值,并記錄讀數(shù);以不含 BSA 的樣品的光吸收值作為空白對 照。 6、以 A562 為縱坐標(biāo),BSA 含量為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算樣品中的蛋白濃度。如 果所得到的蛋白濃度不在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi),請稀釋樣品后重新測定。 試管測定程序:(工作范圍 20-1000 μg/ml) 1、蛋白標(biāo)準(zhǔn)品配制:室溫*溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,取 150µl 5mg/ml BSA 蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液, 加入 600μl PBS 溶液稀釋至 750µl,使其終濃度為 1.0 mg/ml。 2、按照下表配制 BSA 標(biāo)準(zhǔn)測定溶液: 3、將適當(dāng)體積的待測樣品加入到試管中,并用 PBS 補(bǔ)足到 100 µl; 4、向試管中加入 2ml BCA 工作液,混勻,37℃放置 30 分鐘; 5、6 步驟同上。 產(chǎn)品特點(diǎn): 1、靈敏度高,檢測濃度下限達(dá)到 25µg/ml(在 20-1000μg/ml 濃度范圍內(nèi)有較好的線 性關(guān)系),zui小檢測蛋白量達(dá)到 0.2μg,待測樣品體積為 1-20μl。 2、BCA 法測定蛋白濃度的zui大優(yōu)點(diǎn)是蛋白濃度的測定可以耐受高濃度的去垢劑,可以 兼容樣品中高達(dá) 5%的 SDS,5%的 Triton X-100,5%的 Tween 20, 60, 80。但受螯合劑和略 高濃度的還原劑的影響,需確保 EDTA 低于 10mM,無 EGTA,二硫蘇糖醇低于 1mM,β-巰基 乙醇低于 0.01%。 3、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 保存條件: 試劑 A 和試劑 B 室溫貯存;牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液-20℃貯存;PBS 溶液 4℃貯存。本試 劑盒有效期 1 年。

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