發(fā)布時(shí)間: 2018-08-28 點(diǎn)擊次數(shù): 2559次
B27無(wú)血清培養(yǎng)基不含有蛋白質(zhì),但可能含有植物或酵母的水解產(chǎn)物。很多B27無(wú)血清培養(yǎng)基都不含動(dòng)物來(lái)源成分。
B27無(wú)血清培養(yǎng)基的基本配方:
基本成分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基及添加組分兩大部分。用于生物制藥和疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí),多數(shù)呈貼壁生長(zhǎng)或兼性貼壁生長(zhǎng);而當(dāng)其在B27無(wú)血清培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí),由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白,細(xì)胞往往以懸浮形式生長(zhǎng)。
B27無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn):
增加確定性。
性能更加一致。
容易進(jìn)行純化和后期處理。
對(duì)細(xì)胞功能進(jìn)行評(píng)估。
增強(qiáng)生長(zhǎng)和/或產(chǎn)量。
生理反應(yīng)性的更好對(duì)照。
加強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)介質(zhì)的檢測(cè)。
B27無(wú)血清培養(yǎng)基使用方法
血清仍是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中基本的的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或者細(xì)胞生長(zhǎng)狀況不良時(shí),常常會(huì)先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛以后,再換成無(wú)血清培養(yǎng)液。
細(xì)胞轉(zhuǎn)入B27無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)要有一個(gè)適應(yīng)過(guò)程,一般要逐步降低血清濃度,從10%減少到5%,3%,1%,直至無(wú)血清培養(yǎng)。在降低過(guò)程中要注意觀察細(xì)胞形態(tài)是否發(fā)生變化,是否有部分細(xì)胞死亡,存活細(xì)胞是否還保持原有的功能和生物學(xué)特性等。
在實(shí)驗(yàn)后這些細(xì)胞一般不再繼續(xù)保留,很少有細(xì)胞能夠長(zhǎng)期培養(yǎng)于B27無(wú)血清培養(yǎng)基而不發(fā)生改變的。細(xì)胞轉(zhuǎn)入B27無(wú)血清培養(yǎng)基之前,要留有種子細(xì)胞,種子細(xì)胞按常規(guī)培養(yǎng)于含血清的培養(yǎng)基中,以保證細(xì)胞的特性不發(fā)生變化。