RNA/DNA病毒基因組提取試劑盒
簡(jiǎn)要描述:貨 號(hào):R0003名 稱:RNA/DNA病毒基因組提取試劑盒規(guī) 格:50T/100T價(jià) 格:480.00/840.00
產(chǎn)品型號(hào):
所屬分類:其他自產(chǎn)即用試劑
更新時(shí)間:2024-01-07
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
RNA/DNA病毒基因組提取試劑盒
試劑盒組成 | 50T | 100T | 保存溫度 |
蛋白酶K(10mg/ml) | 1ml | 2ml | -20℃ |
結(jié)合液 | 25ml | 50ml | RT |
漂洗液(RNase free) | 15ml | 15ml×2 | 2-8℃ |
玻璃奶 | 1.25ml | 2.5ml | 2-8℃ |
洗脫緩沖液(RNase free) | 10ml | 10ml | 2-8℃ |
原理簡(jiǎn)介
本試劑盒適合于從血清、細(xì)胞上清、淋巴液中提取RNA病毒基因組,也可用于DNA病毒基因組的提取。本試劑盒利用蛋白酶K破開病毒外殼,放出RNA/DNA,用玻璃奶吸附達(dá)到純化目的。
使用本試劑盒提取的RNA/DNA可用于各種常規(guī)操作,包括RT-PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)
1.一般病毒含量過低,zui后提取的基因組RNA/DNA電泳無法檢測(cè)到,但RT-PCR/PCR等其他實(shí)驗(yàn)還會(huì)有結(jié)果。
2.同一樣本,如果想大量提取,可以增加樣本量,并且每一步試劑加量,但使用次數(shù)會(huì)成倍減少。
3. 所有離心步驟用低溫離心機(jī)在4℃條件下離心,如果實(shí)驗(yàn)室沒有低溫離心機(jī),也可以使用常溫離心機(jī),但所提得的RNA可能會(huì)降解嚴(yán)重些。
操作步驟
準(zhǔn)備工作:使用前請(qǐng)先開啟一瓶新的無水乙醇,倒入漂洗液中,倒?jié)M至離瓶口約0.5-1ml,蓋上瓶口,搖勻。
1、 取病毒上清液0.5ml,12000rpm離心5min,盡量取上清使用,棄去沉淀。
2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K,充分混勻,65℃消化10-20min,期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。
3、 向管中加入500ul結(jié)合液,充分混勻。
4.玻璃奶搖勻。加入25ul搖勻的玻璃奶,混勻,室溫放置2分鐘,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清;沉淀加入800ul漂洗液,振蕩混勻,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清,再用600ul漂洗液洗一次。去上清,再次離心2分鐘,用小吸頭吸去上清。
7.室溫放置10分鐘,加入30-50ul洗脫緩沖液混勻溶解,靜置5分鐘。離心,取上清為所提RNA。