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總RNA提取試劑盒

總RNA提取試劑盒

簡要描述:貨  號:R0002
名  稱:總RNA提取試劑盒
規(guī)  格:50T/100T
價  格:360.00/640.00

產(chǎn)品型號:

所屬分類:其他自產(chǎn)即用試劑

更新時間:2024-01-07

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

詳情介紹

總RNA提取試劑

試劑盒組成

50T

100T

保存溫度

裂解液

50ml

100ml

2-8

漂洗液(RNase free)

15ml

15ml×2

2-8

玻璃奶

2.5ml

5ml

2-8

洗脫緩沖液(RNase free)

10ml

10ml

2-8

原理簡介
本試劑以本公司所產(chǎn)總RNA提取試劑(TRIzol)為基礎(chǔ),結(jié)合玻璃奶核酸吸附技術(shù),使zui終提取的RNA試劑純度更高。

注意事項
1 經(jīng)常更換新手套。因為皮膚經(jīng)常帶有細菌,可能導致RNase污染。
2 使用無RNase的塑料制品和槍頭避免交叉污染。
3 所有離心步驟用低溫離心機在4℃條件下離心,如果實驗室沒有低溫離心機,也可以使用常溫離心機,但所提得的RNA可能會降解嚴重些。
 

操作步驟
準備工作:使用前請先開啟一瓶新的無水乙醇,倒入漂洗液中,倒?jié)M至離瓶口約0.5-1ml,蓋上瓶口,搖勻。
1樣品處理:
a,植物組織:以葉片RNA提取為例。取新鮮葉片在液氮中充分研磨,隨后把研磨后的粉末迅速加入到裂解液中。大約50-100mg葉片使用1ml 裂解液。
b,動物組織:以鼠肝臟RNA提取為例。取新鮮或-70凍存組織,大約10-30mg組織加1ml裂解液,用一次性組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。
a,單層培養(yǎng)細胞:直接在培養(yǎng)板中加入裂解液裂解細胞,每10cm2面積加1ml 裂解液。用取樣器吹打混勻。
c,細胞懸液:離心收集細胞。每5-10×106動物、植物和酵母細胞或每107細菌細胞加1ml裂解液。
d,血液處理:直接取新鮮的血液,加入3倍體積紅細胞裂解液,混勻后室溫放置2分鐘,8,000-10,000rpm 離心1分鐘。*吸棄上清,收集白細胞沉淀。每200 ul血液收集的白細胞沉淀加入1 ml裂解液。
2混勻,將勻漿樣品在室溫放置5分鐘,使得核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3向勻漿樣品中加0.2ml氯fang,蓋好管蓋,劇烈振蕩15秒,室溫放置3-5分鐘,使其自然分相。如不能旋渦混勻,可手動顛倒混勻2分鐘代替。
42-8 12,000 rpm離心10分鐘。樣品會分成兩層,RNA主要在上層的水相中,把水相(通常為500μl)轉(zhuǎn)移到新DEPC處理管中。如果上清還有沉淀,可再次離心。
5.玻璃奶搖勻。加入50ul搖勻的玻璃奶,混勻,室溫放置2分鐘,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清;沉淀加入800ul漂洗液,振蕩混勻,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清,再用600ul漂洗液洗一次。去上清,再次離心2分鐘,用小吸頭吸去上清。
7.室溫放置10分鐘,加入50100ul洗脫緩沖液混勻溶解,靜置5分鐘。離心,取上清為所提RNA。
8.電泳或者其他方法檢測,進入下游實驗。



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